Příloha č. 9
Postupy pro laboratorní zkoušení krmiv,
doplňkových látek a premixů

 Seznam postupů chemického zkoušení krmiv

 Název postupu označení
	 postupu
-----------------------------------------------------------------
1. Vlhkost, těkavé látky
1.1. Stanovení obsahu vlhkosti v krmivech      A           B
1.2. Stanovení obsahu vlhkosti a těkavých
     látek v tucích                            A           B
1.3. Stanovení obsahu vlhkosti a obsahu
     těkavých látek v olejnatých semenech      A
2. Dusíkaté sloučeniny
2.1. Stanovení obsahu dusíkatých látek         A           B
2.2. Stanovení obsahu dusíkatých látek
     rozpustných působením roztoku pepsinu
     v kyselině chlorovodíkové                 A           B
2.3. Stanovení obsahu bílkovin                 A           B
2.4. Stanovení obsahu aminokyselin             A           B
2.5. Stanovení obsahu močoviny                 A           B
2.6. Stanovení obsahu amoniaku v rybích
     moučkách                                  A           B
2.7. Stanovení obsahu těkavých dusíkatých
     látek (nebílkovinných dusíkatých látek)   A           B
2.8. Stanovení aktivity ureázy v soji a
     jejích produktech                         A           B
2.9. Ureázový test                             A
2.10.Stanovení obsahu biuretu                  A
3.   Tuk
3.1. Stanovení obsahu tuku                     A           B
3.2. Stanovení obsahu tuku v olejnatých
     semenech                                  A
3.3. Stanovení čísla kyselosti tuku            A
3.4. Stanovení obsahu lecitinu                 A
3.5. Stanovení obsahu nerozpustných nečistot   A
3.6. Stanovení obsahu nezmýdelnitelných
     látek                                     A
3.7. Stanovení peroxidového čísla              A
4.   Polysacharidy
4.1. Stanovení obsahu vlákniny                 A           B
5.   Bezdusíkaté látky výtažkové
5.1. Stanovení obsahu škrobu                   A           B
5.2. Stanovení obsahu škrobu - pankreatický
     postup                                                B
5.3. Stanovení obsahu cukrů                    A           B
5.4. Stanovení obsahu laktosy                  A           B
5.5. Stanovení obsahu bezdusíkatých látek
     výtažkových výpočtem                      A
5.6. Stanovení obsahu cukrů polarizací         A           B
5.7. Stanovení obsahu redukujících látek       A
6.   Popel
6.1. Stanovení obsahu popele                   A           B
6.2. Stanovení obsahu popele v tucích          A
6.3. Stanovení obsahu nerozpustného podílu
     popela v kyselině chlorovodíkové          A           B
7.   Makroelementy
7.1. Stanovení obsahu celkového fosforu        A           B
7.2. Stanovení obsahu vápníku                  A           B
7.3. Stanovení obsahu hořčíku                  A           B
7.4. Stanovení obsahu draslíku                 A           B
7.5. Stanovení obsahu sodíku                   A           B
7.6. Stanovení obsahu ve vodě rozpustných
     chloridů                                  A           B
7.7. Stanovení obsahu celkových uhličitanů     A           B
7.8. Stanovení obsahu oxidů křemíku, železa,
     hliníku, vápníku a hořčíku (ve vápencích) A           B
7.9. Stanovení celkového obsahu síry           A           B
8.   Mikroelementy
8.1. Stanovení obsahů mědi, železa, manganu
     a zinku                                   A
8.2. Stanovení obsahu mědi, železa, manganu
     a zinku včetně obsahu vápníku, hořčíku,
     draslíku a sodíku                                     B
9.   Kyselost
9.1. Stanovení volné, vázané a celkové
     kyselosti vodního výluhu                  A
9.2. Stanovení kyselosti vodního výluhu
     v mléčných krmných směsích                A
10.  Nežádoucí látky
10.1. Stanovení obsahu alkaloidů v lupině                  B
10.2. Stanovení obsahu kyanovodíku                         B
10.3. Stanovení obsahu hořčičného oleje        A           B
10.4. Stanovení obsahu theobrominu                         B
10.5. Stanovení obsahu glukosinolátů v řepce   A           B
10.6. Stanovení obsahu
      5-vinyl-2-thiooxazolidonu                A           B
10.7. Stanovení obsahu kyseliny erukové        A
10.8. Stanovení obsahu olova a kadmia          A
10.9. Stanovení obsahu ricinu                  A           B
10.10.Stanovení obsahu fluoru                              B
10.11.Stanovení obsahu reziduí organochlorových
      a organofosfátových pesticidů                        B
10.12.Stanovení obsahu hexachlorbenzenu                    B
10.13.Stanovení obsahu chlordanu                           B
10.14.Stanovení obsahu dusitanů                            B
10.15.Stanovení obsahu rtuti                   A
10.16.Stanovení obsahu aflatoxinu B1                       B
10.17.Stanovení obsahu arsenu                              B
11.   Zkoušení siláží
11.1. Zkoušení jakosti siláží                  A           B

1. Vlhkost, těkavé látky

 1.1. Stanovení obsahu vlhkosti v krmivech

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vlhkosti v krmivech, premixech a doplňkových látkách. Postup je použitelný pro stanovení obsahu vlhkosti všech druhů krmiv, premixů a doplňkových látek s výjimkou olejnatých semen.
 Obsah vlhkosti se stanoví vážkově jako úbytek po vysušení vzorku za předepsané teploty podle druhu vzorku krmiva, doplňkové látky nebo premixu.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí pro všechny obsahy vlhkosti překročit 0,2 %.

 1.2. Stanovení obsahu vlhkosti a těkavých látek v tucích

 Účel, rozsah a princip

 Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu vlhkosti a těkavých látek v tucích.
 Obsah vlhkosti a těkavých látek se odpaří sušením při (103 plus mínus 2) stupňů Celsia a úbytek hmotnosti se stanoví vážkově.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vlhkosti:
 do 2 % 10 % relat.
 nad 2 % 0,2 % abs.

 1.3. Stanovení obsahu vlhkosti a těkavých látek v olejnatých
	 semenech

 Účel, rozsah a princip

 Postup určuje podmínky pro stanovení obsahu vlhkosti a těkavých látek v olejnatých semenech.
 Stanovení obsahu vlhkosti a těkavých látek se provádí buď z materiálu tak, jak byl získán (čistá semena včetně nečistot) nebo, pokud je to požadováno, ze samotných čistých semen sušením při teplotě (103 plus mínus 2) stupňů Celsia v sušárně při atmosférickém tlaku do konstantní hmotnosti, vážkově.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí pro všechny obsahy vlhkosti překročit 0,2 %.

2. Dusíkaté sloučeniny

 2.1. Stanovení obsahu dusíkatých látek

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu dusíkatých látek v krmivech podle Kjeldahla. Postup stanovení obsahu dusíkatých látek je použitelný pro všechny obsahy dusíkatých látek ve všech krmivech, kromě stanovení obsahu dusíku v dusičnanech, dusitanech, popř. azo nebo hydrazosloučeninách.
 Po mineralizaci vzorku horkou kyselinou sírovou za přítomnosti katalyzátoru se vytěsní amoniak hydroxidem sodným. Dusíkaté látky se stanoví titračně alkalimetricky (acidimetricky).

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu dusíkatých látek:
 do 200 g/kg 2 g/kg
 od 201 g/kg do 400 g/kg 1 % relat.
 nad 400 g/kg 4 g/kg

 2.2. Stanovení obsahu dusíkatých látek rozpustných působením roztoku pepsinu v kyselině chlorovodíkové

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu dusíkatých látek rozpustných působením roztoku pepsinu v kyselině chlorovodíkové v krmivech. Postup stanovení je použitelný pro všechny obsahy a všechny druhy krmiv, s výjimkou krmiv s aditivním obsahem močoviny a krmiv minerálních.
 Obsah dusíkatých látek rozpustných působením pepsinu v kyselině chlorovodíkové se stanoví po 48 hodinách inkubaci vzorku s pepsinem při 40 stupních Celsia metodou podle Kjeldahla.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu dusíkatých látek rozpustných působením roztoku pepsinu v kyselině chlorovodíkové:
 do 200 g/kg 4 g/kg
 od 201 do 400 g/kg 2 % relat.
 nad 400 g/kg 8 g/kg

 2.3. Stanovení obsahu bílkovin

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu bílkovin v krmivech a je použitelný pro všechna krmiva organického původu.
 Obsah bílkovin se stanoví metodou podle Barnsteina po jeho oddělení od dusíkatých látek nebílkovinného původu vysrážením měďnatou solí.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 2.4. Stanovení obsahu aminokyselin

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu aminokyselin v krmivech.
 Aminokyseliny (glycin, alanin, serin, threonin, valin, isoleucin, leucin, lysin, arginin, kyselina asparagová, kyselina glutamová, fenylalanin, tyrosin, histidin, prolin, cystin, methionin a tryptofan) uvolněné ze vzorku, se stanoví metodou kapalinové chromatografie a jejich obsah se vypočte porovnáním se standardem.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 5 % relat.

 2.5. Stanovení obsahu močoviny

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu močoviny v krmivech s aditivním obsahem této látky. Močovina se stanoví, po vyčeření vodního výluhu vzorku Carresovými činidly, reakcí s p-dimethylaminobenzaldehydem spektrofotometricky při vlnové délce 420 nm.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 2.6. Stanovení obsahu amoniaku v rybích moučkách

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu amoniaku v rybích moučkách. Je použitelný pro obsahy amoniaku, vyjádřené jako NH3, do hodnoty 2 500 mg/kg.
 Amoniak se ze vzorku extrahuje do vodního výluhu, vytěsní se oxidem hořečnatým a stanoví se titračně alkalimetricky (acidimetricky).

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 10 % relativních.

 2.7. Stanovení obsahu těkavých dusíkatých látek

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu těkavých dusíkatých látek vyjádřených jako amoniak v krmivech.
 Vzorek se extrahuje vodou, těkavé dusíkaté látky se uvolní uhličitanem draselným a pomocí mikrodifuze se jímají do roztoku kyseliny borité a jsou stanoveny kyselinou sírovou titračně.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí přesáhnout při
 obsahu amoniaku: do 10 g/kg 10 % relat.
	 vyšším než 10 g/kg 1,0 g/kg

 2.8. Stanovení aktivity ureázy v soji a jejích produktech

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení aktivity ureázy v soji a jejích produktech do hodnoty aktivity ureázy 1 mgN^g) min při 30 stupních Celsia.
 Aktivita ureázy se stanoví titračně alkalimetricky určením množství amoniakálního dusíku, uvolněného z roztoku močoviny jedním gramem zkoušeného vzorku za jednu minutu při teplotě 30 stupňů Celsia.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 2.9. Ureázový test

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení aktivity ureázy v soji a jejích produktech.
 Aktivita ureázy se stanoví titračně alkalimetricky určením množství amoniaku, uvolněného z roztoku močoviny ureázou ze zkoušeného vzorku za 1 hodinu.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 2.10. Stanovení obsahu biuretu

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu biuretu v močovině.
 Postup je založen na tvorbě barevného komplexu biuretu se síranem měďnatým a měření absorbance vybarveného roztoku při vlnové délce 540 nm.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 0,3 g/kg.

3. Tuk

 3.1. Stanovení obsahu tuku

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu tuku (hexanového, petroletherového a diethyletherového extraktu) v krmivech. Postup není vhodný pro stanovení obsahu tuku v olejninách.
 Tuk ze vzorku se izoluje buď přímou extrakcí příslušným extrakčním činidlem nebo extrakcí po předběžné hydrolýze, a obsah tuku se
 stanoví vážkově.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit pro obsah tuku:
 do 50 g/kg 2 g/kg
 od 51 do 100 g/kg 4 % relat.
 nad 100 g/kg 4 g/kg

 3.2. Stanovení obsahu tuku v olejnatých semenech

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu tuku (hexanového nebo petroletherového extraktu) v olejnatých semenech.
 Obsah tuku ("oleje") se stanoví po extrakci vzorku hexanem nebo petroletherem na vhodném zařízení, následným oddestilováním extrakčního činidla a zvážením vysušeného vyextrahovaného tuku.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit hodnotu 4 g/kg.

 3.3. Stanovení čísla kyselosti tuku

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení čísla kyselosti tuku v krmivech.
 Číslo kyselosti tuku se stanoví po rozpuštění tuku
 vyextrahovaného z krmiva ve směsi extrakčního činidla s ethylalkoholem titračně alkalimetricky. Způsob extrakce tuku závisí na druhu zkoušeného krmiva.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku pro hodnoty větší než 4 mg KOH/g (resp. 0,07 mmol/g) nesmí překročit 15 % relativních.

 3.4. Stanovení obsahu lecitinu

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu lecitinu v krmivech.
 Stanoví se obsah látek rozpustných v acetonu, obsah látek nerozpustných v benzenu nebo toluenu a obsah vlhkosti s těkavými látkami a jejich součet se odečte od 100.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 10 g/kg.

 3.5. Stanovení obsahu nerozpustných nečistot v tucích a olejích

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu nerozpustných nečistot v živočišných a rostlinných tucích nebo olejích.
 Obsah nerozpustných nečistot se stanoví rozpuštěním vzorku v přebytku n-hexanu nebo petroletheru nebo diethyletheru, filtrací získaného roztoku a zvážením vysušeného filtru s nerozpustnými nečistotami.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu nerozpustných nečistot:
 do 3,0 g/kg 0,2 g/kg nerozpustných nečistot
 nad 3,0 g/kg 0,5 g/kg nerozpustných nečistot

 3.6. Stanovení obsahu nezmýdelnitelných látek v tucích a olejích

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení nezmýdelnitelného podílu v živočišných a rostlinných tucích a olejích. Postup není použitelný pro vosky a dává přibližné výsledky u tuků s vyšším obsahem nezmýdelnitelného podílu, např. u tuků pocházející z mořských živočichů.
 Tuk nebo olej se zmýdelní varem s ethanolickým roztokem hydroxidu draselného pod zpětným chladičem. Nezmýdelnitelný podíl se vyextrahuje z roztoku mýdla diethyletherem a po oddestilování rozpouštědla a vysušení se zváží.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu nezmýdelnitelných látek:
 do 50 g/kg 0,5 g/kg
 od 50 do 100 g/kg 1 g/kg

 3.7. Stanovení peroxidového čísla

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení peroxidového čísla v živočišných a rostlinných tucích a olejích.
 Peroxidové číslo se určí reakcí chloroformového extraktu vzorku s jodidem draselným v roztoku kyseliny octové a chloroformu a následnou titrací uvolněného jodu odměrným roztokem thiosíranu sodného.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí přesáhnout při hodnotě:
 méně než 0,5 mmol/kg hodnotu 0,1 mmol/kg
	 od 0,5 do 3 mmol/kg hodnotu 0,2 mmol/kg
	 od 3 do 6 mmol/kg hodnotu 0,5 mmol/kg
	 větší než 6 mmol/kg hodnotu 1,0 mmol/kg

4. Polysacharidy

 4.1. Stanovení obsahu vlákniny

 Účel, rozsah a princip

 Používají se dvě modifikace postupu, pro manuální a pro přístrojové provedení. Postupy jsou použitelné pro všechna krmiva, kde obsah vlákniny je vyšší než 10 g/kg.
 Obsah vlákniny se stanoví vážkově jako nezhydrolyzovatelný zbytek vzorku po kyselé a alkalické hydrolýze, od kterého se odečte obsah popela.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit pro obsahy vlákniny:
 do 100 g/kg 4 g/kg
 nad 100 g/kg 4 % relat.

5. Bezdusíkaté látky výtažkové

 5.1. Stanovení obsahu škrobu

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení celkového obsahu škrobu v krmivech. Postup nelze použít pro krmiva s relativně vysokým obsahem polymerů fruktosy, a to pro krmiva obsahující řepné řízky a bulvy, skrojky, jakož i zdrtky těchto plodin, dále kvasnice a krmiva bohatá na inulin.
 Škrob se stanoví polarimetricky po hydrolýze vzorku kyselinou chlorovodíkovou a odstranění bílkovin Carresovými činidly, změřením optické otáčivosti a provedením korekce na opticky aktivní látky rozpustné ve směsi ethylalkohol-voda.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit pro obsahy škrobu:
 nižší než 400 g/kg 4 g/kg
 vyšší než 400 g/kg 1 % relat.

 5.2. Stanovení obsahu škrobu - pankreatický postup

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení škrobu a výšemolekulárních degradačních produktů škrobu v krmivech obsahujících řepné řízky, skrojky, rajčatovou pastu, sušené kvasnice a krmiva bohatá na inulin. Stanovení škrobu v těchto materiálech se provádí pouze tehdy, jestliže mikroskopické vyšetření prokáže přítomnost dostatečného množství škrobu.
 Cukry přítomné ve vzorku se extrahují roztokem ethylalkoholu. Škrob v extrakčním zbytku se rozloží pankreatinem, vzniklé cukry se hydrolyzují kyselinou chlorovodíkovou a vzniklá glukosa se stanoví Luff-Schoorlovou metodou. Obsah škrobu se zjistí vynásobením množství glukosy konstantním faktorem.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 5.3. Stanovení obsahu cukrů

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu cukrů v krmivech a je použitelný pro všechna krmiva a pro všechny obsahy cukrů.
 Obsah cukrů se stanoví v ethanolickém extraktu vzorku titračně jodometricky postupem podle Luff-Schoorla.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 5.4. Stanovení obsahu laktosy

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu laktosy v krmivech. Postup je použitelný pro krmiva obsahující více než 5 g laktosy v 1 kg krmiva.
 Laktosa se spolu s ostatními cukry vyextrahuje ze vzorku vodou, extrakt se vystaví fermentačnímu účinku kvasinek Saccharomyces cerevisiae, které ponechají laktosu v nezměněném stavu. Po vyčeření Carresovými činidly se laktosa stanoví titračně jodometricky podle Luff-Schoorla.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 5.5. Stanovení obsahu bezdusíkatých látek výtažkových

 Účel, rozsah a princip

 Postup uvádí způsob výpočtu obsahu bezdusíkatých látek výtažkových z výsledků stanovení základních složek krmiv, a to vlhkosti, dusíkatých látek (N x 6,25), tuku, popele a vlákniny, případně močoviny a amoniaku.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 5.6. Stanovení obsahu cukrů polarizací

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu cukrů polarizací v krmném cukru, melase a mléce.
 Pro stanovení obsahu cukrů se využívá jejich schopnosti otáčet rovinu polarizovaného světla úměrně druhu a obsahu cukrů v roztoku.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku pro všechny obsahy cukrů nesmí překročit 1 /kg.

 5.7. Stanovení redukujících látek v cukru a melase

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu redukujících látek v surovém a afinovaném cukru a řepné melase.
 Cukerný roztok se povaří s Ofnerovým roztokem a vyloučený oxid měďnatý se stanoví jodometrickou titrací.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

6. Popel

 6.1. Stanovení obsahu popela

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu popela v krmivech. Postup je použitelný pro všechna krmiva a pro všechny obsahy popela.
 Obsah popela se stanoví vážkově jako zbytek hmoty po zpopelnění při teplotě 550 stupňů Celsia do konstantní hmotnosti za předepsaných podmínek.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu popela:
 do 30 g/kg 3 g/kg
 od 31 g/kg do 50 g/kg 10 relat.
 od 51 do 200 g/kg 5 g/kg
 od 201 do 400 g/kg 2,5 % relat.
	 nad 400 g/kg 10 g/kg

 6.2. Stanovení obsahu popela v tucích

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu popela. Postup je použitelný pro všechny živočišné a rostlinné tuky a oleje, včetně kyselých tuků.
 Vzorek tuku se spálí při určené teplotě a získaný zbytek se určí vážkově.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu popela v tucích:
 do 1 g/kg 20 % relat.
 nad 1 g/kg 15 % relat.

 6.3. Stanovení obsahu nerozpustného podílu popela v kyselině chlorovodíkové

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu nerozpustného podílu popela v kyselině chlorovodíkové v krmivech a premixech. Postup je použitelný pro všechny hodnoty podílu popela nerozpustného v kyselině chlorovodíkové.
 Obsah nerozpustného podílu popela v kyselině chlorovodíkové se stanoví vážkově jako zbytek po rozpuštění popela nebo přímo rozpuštění vzorku v kyselině chlorovodíkové.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu nerozpustného podílu popela v kyselině chlorovodíkové:
	 do 10 g/kg 1 g/kg
 od 11 do 50 g/kg 10 % relat.
 od 51 do 200 g/kg 5 g/kg
 od 201 do 400 g/kg 2,5 % relat.
	 nad 400 g/kg 10 g/kg

7. Makroelementy

 7.1. Stanovení obsahu celkového fosforu

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu celkového fosforu v krmivech a premixech.
 Obsah celkového fosforu se stanoví po reakci s molybdátovanadátovým činidlem spektrofotometricky nebo po vysrážení chinolinovým činidlem vážkově.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními spektrofotometrickými stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu celkového fosforu: 
do 50 g/kg            3 % relat.
nad 50 g/kg          0,15 g/kg

 Opakovatelnost pro vážkový postup nestanovena

 7.2. Stanovení obsahu vápníku

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení celkového obsahu vápníku v krmivech a premixech od obsahu vápníku 0,5 g/kg.
 Obsah vápníku se stanoví z chloridového výluhu popela vzorku nebo u minerálních krmiv po rozpuštění vzorku v kyselině chlorovodíkové. Stanoví se titračně manganometricky nebo vážkově jako síran vápenatý nebo metodou atomové absorpční spektrometrie (AAS) nebo titračně chelatometricky (pro krmné směsi).

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními manganometrickými stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu vápníku:
 pod 50 g/kg 1 g/kg
 nad 50 g/kg 2 % relat.

 Opakovatelnost pro postup vážkový, spektrometrický (AAS) a chelatometrický nestanovena.

 7.3. Stanovení obsahu hořčíku

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení celkového obsahu hořčíku v krmivech a premixech.
 Postup je vhodný zejména pro obsahy hořčíku do 50 g/kg.
 Obsah hořčíku se stanoví po mineralizaci vzorku (organická krmiva) nebo po přímém rozpouštění (minerální krmiva) v chloridovém výluhu metodou atomové absorpční spektrometrie (AAS).

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit pro všechny obsahy hořčíku 5 % relat.

 7.4. Stanovení obsahu draslíku

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení celkového obsahu draslíku v krmivech a premixech.
 Obsah draslíku se stanoví v chloridovém výluhu po zpopelnění vzorku metodou emisní plamenové spektrometrie.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu draslíku:
 od 2 do 50 g/kg 10 % relat.
	 nad 50 g/kg 5 g/kg

 7.5. Stanovení obsahu sodíku
y
 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení celkového obsahu sodíku v krmivech a premixech.
 Obsah sodíku se stanoví v chloridovém výluhu po zpopelnění vzorku metodou emisní plamenové spektrometrie.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu sodíku:
 od 2 g/kg do 50 g/kg 10 % relat.
	 nad 50 g/kg 5 g/kg

 7.6. Stanovení obsahu ve vodě rozpustných chloridů

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení ve vodě rozpustných chloridů v krmivech a premixech.
 Postup zahrnuje použití pro všechna krmiva a premixy a všechny obsahy ve vodě rozpustných chloridů.
 Chloridy se stanoví nepřímou argentometrickou titrací podle Volharda z vodního výluhu vzorku po vyčeření Carresovými činidly.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu chloridů pro obsahy:
 do 10 g/kg 0,5 g/kg
 nad 10 g/kg 5 % relat.
 u obsahu chloridů v rybích moučkách 10 % relat.

 7.7. Stanovení obsahu celkových uhličitanů

 Po
 stup specifikuje podmínky pro stanovení celkových uhličitanů
 v krmných směsích a minerálních krmivech a je použitelný pro obsahy od 5 do 100 g/kg.
 Obsah celkových uhličitanů se stanoví po rozkladu vzorku kyselinou chlorovodíkovou a vzniklý oxid uhličitý se změří volumetricky nebo manometricky.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 7.8. Stanovení obsahu oxidů křemíku, železa, hliníku, vápníku a hořčíku (ve vápencích)

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení uvedených oxidů ve vápencích.
 Po rozkladu vzorku tavením se stanoví obsah oxidu křemičitého vážkově. Ve filtrátu po stanovení oxidu křemičitého se stanoví oxid železitý a hlinitý vážkově. Ve filtrátu po stanovení oxidu železitého a hlinitého se stanoví oxid vápenatý a hořečnatý titračně chelatometricky.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními obsahu oxidu křemičitého prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 2 g/kg.
 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními obsahu oxidů železa a hliníku prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu oxidů: do 10 g/kg 0,7 g/kg
od 10,1 do  25 g/kg                 1,0 g/kg
od 25,1 do  50 g/kg                 1,5 g/kg
od 50,1 do 100 g/kg                 2,5 g/kg
nad 100 g/kg                           4,0 g/kg

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními obsahu oxidu vápenatého prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit 4,5 g/kg.
 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními obsahu oxidu hořečnatého prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu:
 do 10 g/kg              1,5 g/kg
 nad 10 g/kg            3 g/kg

 7.9. Stanovení celkového obsahu síry

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení celkového obsahu síry v krmivech. Je vhodný pro všechny obsahy síry v krmivech.
 Obsah síry se stanoví v chloridovém výluhu po zpopelnění vzorku a přidání roztoku chloridu barnatého vážkově jako síran barnatý.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

8. Mikroelementy

 8.1. Stanovení obsahů mědi, železa, manganu a zinku

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení mědi, železa, manganu a zinku v krmivech a premixech. Lze stanovit všechny formy uvedených prvků.
 Obsah mědi, železa, manganu a zinku se stanoví po mineralizaci vzorku (u organických krmiv) nebo po přímém rozpouštění (u minerálních krmiv) v chloridovém výluhu metodou atomové absorpční spektrometrie (AAS).

 Opakovatelnost

 Nestanovena

 8.2. Stanovení obsahu manganu, zinku, mědi a železa, včetně obsahu hořčíku, draslíku, sodíku a vápníku

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje stanovení obsahu mikroprvků manganu, zinku, mědi, železa a makroprvků hořčíku, draslíku, sodíku a vápníku v krmivech a premixech.
 Uvedené prvky se stanoví po mineralizaci vzorku (u organických krmiv) nebo po přímém rozpuštění (u minerálních krmiv), případně po odstranění oxidu křemičitého metodou atomové absorpční spektrofotometrie.
 Vzorek se převede do roztoku kyselinou chlorovodíkovou, pokud je třeba po zpopelnění, případně po odstranění oxidu křemičitého, a uvedené prvky se stanoví po vhodném naředění metodou atomové absorpční spektrometrie.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit pro stanovení obsahu vápníku, železa, draslíku, hořčíku a manganu 0,11 . X1) mg/kg
 pro stanovení obsahu mědi, sodíku a zinku 0,15 . X1) mg/kg
 1) X je výsledek stanovení.
 Uvedená opakovatelnost platí pro obsahy
 vápníku od 1 do 300 g/kg
 mědi od 15 do 15 000 mg/kg
 železa od 2 000 do 30 000 mg/kg
 hořčíku od 1 do 110 g/kg
 manganu od 15 do 15 000 mg/kg
 sodíku od 2 do 250 g/kg
 zinku od 25 do 15 000 mg/kg

9. Kyselost

 9.1. Stanovení volné, vázané a celkové kyselosti vodního výluhu

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení volné, vázané a celkové kyselosti vodního výluhu. Je použitelný pro všechny krmiva s výjimkou stanovení kyselosti vodního výluhu v mléčných krmných směsích.
 Volná kyselost vodního výluhu se stanoví přímo alkalimetrickou titrací vodního výluhu vzorku do hodnoty pH = 8,5 nebo na indikátor fenolftalein.
 Vázaná kyselost vodního výluhu se stanoví po uvolnění vazeb vnitřní neutralizace formaldehydem alkalimetrickou titrací do hodnoty pH = 8,5 nebo na indikátor fenolftalein.
 Celková kyselost vodního výluhu se určí součtem výsledků volné a vázané kyselosti vodního výluhu.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit pro všechny hodnoty kyselosti 15 % relativních.

 9.2. Stanovení kyselosti vodního výluhu v mléčných krmných směsích

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení kyselosti vodního výluhu v mléčných krmných směsích. Je použitelný pro všechny druhy mléčných krmných směsí a všechny obsahy kyselosti.
 Kyselost vodního výluhu se stanoví ve vodním výluhu vzorku přímo alkalimetrickou titrací na indikátor fenolftalein pomocí určení bodu ekvivalence srovnávacím roztokem kobaltnaté soli.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10. Nežádoucí látky

10.1. Stanovení obsahu alkaloidů v lupině

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu alkaloidů v semenech lupiny.
 Alkaloidy se vyluhují ze vzorku směsí diethyletheru a chloroformu, extrahují se kyselinou chlorovodíkovou a potom se vysráží kyselinou tetrakis(triwolframato)křemičitou H4[Si(W3O10)4].
 Sraženina se zpopelní a alkaloidy se stanoví jako zbytek po spálení vážkově.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.2. Stanovení obsahu kyanovodíku

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu kyanovodíku (volného i vázaného v glukosinolátech) v krmivech, zejména v lněném semeni, maniokové mouce a v některých druzích bobů.
 Vzorek se rozmíchá ve vodě, kyanovodík se uvolní enzymaticky a vodní parou se předestiluje do okyseleného roztoku dusičnanu stříbrného. Kyanid stříbrný se oddělí filtrací a zbylý dusičnan stříbrný se stanoví titračně thiokyanatanem amonným.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.3. Stanovení obsahu hořčičného oleje (allylisothiokyanát)

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu hořčičného oleje v pokrutinách a extrahovaných šrotech z olejnatých semen rodu Brassica a Sinapis a v krmných směsích, které tyto pokrutiny nebo extrahované šroty obsahují. Hořčičný olej se vyjadřuje jako allylisothiokyanát.
 Hořčičný olej se enzymaticky uvolní, vytěsní destilací a po reakci s dusičnanem stříbrným se stanoví obsah allylisothiokyanátu titračně.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.4. Stanovení obsahu theobrominu

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu theobrominu v krmivech a premixech. Obsah theobrominu se stanoví po extrakci ze vzorku směsným rozpouštědlem chloroform-amoniak metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) na reversní fázi.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.5. Stanovení obsahu glukosinolátů v řepce

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu nejdůležitějších glukosinolátů v řepce a jejích produktech.
 Obsah glukosinolátů se stanoví po enzymatické hydrolýze v prostředí pufru metodou plynové chromatografie.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.6. Stanovení obsahu 5-vinyl-2-thiooxazolidonu (goitrin)

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu vinylthiooxazolidonu (VOT) v krmivech a je použitelný pro obsahy VOT nad 200 mg/kg.
 Ze vzorku krmiva je enzymaticky uvolněn 2-hydroxy-3-butenyl-isothiokyanát, ze kterého vzniká VOT a jeho obsah se stanoví metodou plynové chromatografie nebo vysokoúčinné kapalinové chromatografie.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.7. Stanovení obsahu kyseliny erukové

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení kyseliny erukové ve všech druzích rostlinných tuků a olejů různého stupně čistoty. Obsah kyseliny erukové (kyseliny cis, trans-11 dokosenové a kyseliny cis, trans 13-dokosenové) je vyjádřen jako hmotnostní podíl mastných kyselin C 22 : 1 z celého spektra mastných kyselin ve vzorku.
 Obsah kyseliny erukové se stanoví po esterifikaci mastných kyselin metodou plynové chromatografie.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.8. Stanovení obsahu kadmia a olova

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu kadmia a olova v krmivech. Postup není vhodný pro premixy.
 Obsah olova a kadmia se stanoví v dusičnanovém výluhu popela metodou atomové absorpční spektrometrie nebo anodické rozpouštěcí voltametrie s předkoncentrací na visící rtuťové kapkové elektrodě.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.9. Stanovení obsahu ricinových slupek

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu ricinových slupek.
 Ricinové slupky se uvolní vařením zkušebního vzorku v kyselém a alkalickém prostředí a jejich obsah se stanoví vážkově.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.10. Stanovení obsahu fluoru

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení fluoru v krmivech.
 Obsah fluoru se stanoví v chloridovém výluhu popela iontově selektivní elektrodou.

 Opakovatelnost

 Nezjištěna

10.11. Stanovení obsahu reziduí organochlorových a organofosfátových pesticidů

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu aldrinu, dieldrinu, DDT, DDE, TDE, endrinu, heptachloru, hexachlorcyklohexanu (HCH) a polychlorovaných bifenylů (PCB) v krmivech.
 Rezidua pesticidů a polychlorovaných bifenylů (PCB) se extrahují z krmiv vhodným rozpouštědlem a v extraktu se stanoví jejich obsah pomocí chromatografických metod (papírové, tenkovrstevné nebo plynové).

 Opakovatelnost

 Nezjištěna

10.12. Stanovení obsahu hexachlorbenzenu

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu hexachlorbenzenu (HCB) v tucích. Obsah hexachlorbenzenu (HCB) se stanoví po přečištění a extrakci metodou plynové chromatografie.

 Opakovatelnost

 Nezjištěna

10.13. Stanovení obsahu dusitanů

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu dusitanů v krmivech.
 Ve filtrátu alkalického výluhu vzorku se obsah dusitanů stanoví po diazotaci kyselinou sulfanilovou a následné kopulaci s N-naftyl-1-etylendiamindihydrochloridem spektrofotometricky.

 Opakovatelnost

 Nezjištěna

10.14 Stanovení obsahu rtuti

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu rtuti v krmivech. Obsah rtuti v krmivech se stanoví metodou studených par na rtuťovém analyzátoru TMA.

 Opakovatelnost

 Nestanovena

10.15. Stanovení obsahu aflatoxinu B1

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení aflatoxinu B1 v krmivech, včetně těch, která obsahují slupky citrusů. Limit detekce je 1 gama g/kg.
 Vzorek krmiva se extrahuje chloroformem, získaný extrakt se zfiltruje a přečistí na florisilové koloně s náplní C18. Konečné rozdělení a stanovení se provede metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) za použití reverzní fáze a postkolonové derivatizace jodem a fluorescenční detekce.
 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit při obsahu aflatoxinu B1:
 od 10 gama g/kg do 20 gama g/kg 50 % relat.
 od 20 gama g/kg do 50 gama g/kg 10 gama g/kg
 nad 50 gama g/kg 20 % relat.

10.16. Stanovení obsahu arsenu

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro stanovení obsahu arsenu v krmivech.
 Ve vzorku se po rozkladu kyselinou dusičnou v uzavřeném systému stanoví obsah arsenu metodou atomové absorpční spektrometrie s hydridovou technikou.

 Opakovatelnost

 Nezjištěna

11. Zkoušení siláží

11.1. Zkoušení jakosti siláží

 Účel, rozsah a princip

 Postup specifikuje podmínky pro zkoušení jakosti silážovaných krmiv. Postupy zkoušení jsou použitelné pro všechny druhy silážovaných krmiv.
 Ze vzorku siláže se připraví vodní výluh. Ve výluhu se určí hodnota pH elektrometricky, obsah amoniaku se stanoví difuzní Conwayovou metodou, obsah alkoholu se stanoví metodou plynové chromatografie a obsah silážních kyselin metodou kapilární izotachoforézy.
 Stanovení stlačitelnosti u řízkových siláží se provádí samostatně.

 Opakovatelnost

 Rozdíl mezi dvěma paralelními stanoveními prováděnými na stejném vzorku nesmí překročit u stanovení pH 0,05
	 formolové titrace 0,1
	 obsahu amoniaku jako NH3 0,1
	 obsahu silážních kyselin 1,0

 U stanovení obsahu alkoholu a stlačitelnosti siláží nestanoveno.